黄病毒(flavivirus)是具有包膜的单股正链RNA病毒,衣壳蛋白(Capsid, Cap)是其结构蛋白之一,能与病毒RNA结合,形成核衣壳,对病毒RNA起到保护作用,还具有与宿主蛋白相互作用,诱导细胞凋亡等功能。
本试验利用病毒衣壳蛋白靶向抗病毒(capsid-targeted viral inactivation,CTVI))策略探讨鸭坦布苏疫病的防控。本试验选择SNase作为外源基因,与病毒的结构蛋白Cap进行融合,构建pcDNA3.1(+)-Cap-SNase和pcDNA3.1(+)-Cap-Linker-SNase真核重组质粒,在BHK21细胞上体外探究融合蛋白的表达分析,核酸酶活性分析及细胞毒性分析,最后进行了抗病毒效果检测。试验结果发现,融合蛋白在BHK21和DF-1细胞上均能表达,且具有核酸酶活性,抗病毒试验发现融合蛋白具有一定的抗病毒效果。同时对比发现,在两个蛋白之间添加Linker对蛋白的表达,核酸酶活性,及抗病毒效果都有一定的促进作用。
详细内容以“Therapeutic effects of duck Tembusu virus capsid protein fused with staphylococcal nuclease protein to target Tembusu infection in vitro”为题,发表在Veterinary Microbiology, 2019(235), 295-300.DOI: 10.1016/j.vetmic.2019.07.025。
论文链接https://authors.elsevier.com/a/1ZSaK1L~Hg0C01

图为融合蛋白的核酸酶活性分析