非结构蛋白3A作为I-ELISA抗原检测1和3型鸭甲肝抗体
作者:    发布于:2019-04-09 13:19:02    点击数:

     

     

     鸭病毒性肝炎是一种主要由鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus type,DHAV)感染引起鸭的高度致死性传染病。1型鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus type 1,DHAV-1)和3型鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus type 3,DHAV-3)是在我国危害最严重、传播最广泛的两种鸭甲肝病毒亚型,快速检测其抗体是开展该病流行病学调查、疫苗免疫效果评价等不可或缺的手段。

     间接酶联免疫吸附剂测定法(Indirect enzyme-linked immunosorbent assay,I-ELISA)是一种通过抗原或抗体来检测病原的分子生物学方法,准确高效,简单易于操作。DHAV感染进程中,具有感染性的病毒在复制过程中产生非结构蛋白,而灭活病毒(疫苗)免疫则不产生非结构蛋白。蛋白抗原的同源性决定了其检测方法的特异性。3A蛋白同源性比对分析发现,DHAV-1和DHAV-3非结构蛋白3A具有高度同源性。我们以DHAV-1非结构蛋白3A为抗原建立了检测DHAV-1和DHAV-3感染鸭血清抗体的I-ELISA法,为区分DHAV-1感染鸭和灭活疫苗免疫鸭提供有效方法。建立的3A-DHAV-1-ELISA特异性检测表明,该法只能特异检出DHAV-1和DHAV-3感染鸭血清(出现阳性反应),与多种常见鸭病原感染鸭血清不产生交叉(阴性反应),可用于DHAV-1和DHAV-3活病毒感染鸭的抗体检测。

     相关结果以“Development and evaluation of an indirect ELISA based on recombinant nonstructural protein 3A to detect antibodies to duck hepatitis A virus type 1”为题发表于Journal of Virological Methods 2019, 268: 56-61. DOI: 10.1016/j.jviromet.2019.03.012

 

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